زيت سابوشنيكوفيا ديفاريكاتا النقي لصناعة الشموع والصابون، زيت عطري جديد لموزعات الروائح الخشبية

وصف مختصر:

2.1. إعداد SDE

تم شراء جذور نبات SD كعشبة مجففة من شركة هانهيرب (غوري، كوريا). وتأكد الدكتور غو-يا تشوي من المعهد الكوري للطب الشرقي (KIOM) من المواد النباتية تصنيفيًا. وُضعت عينة قسيمة (رقم 2014 SDE-6) في المعشبة الكورية للموارد العشبية القياسية. استُخلصت جذور نبات SD المجففة (320 غ) مرتين باستخدام إيثانول بنسبة 70% (مع ارتجاع لمدة ساعتين)، ثم رُكّز المستخلص تحت ضغط منخفض. ثم رُشّح المغلي، وجُفّد بالتجميد، وحُفظ عند درجة حرارة 4 درجات مئوية. بلغت نسبة إنتاج المستخلص المجفف من المواد الخام الأولية 48.13% (وزن/وزن).

2.2. التحليل الكمي باستخدام كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء (HPLC)

أُجري التحليل الكروماتوغرافي باستخدام نظام HPLC (شركة ووترز، ميلفورد، ماساتشوستس، الولايات المتحدة الأمريكية) وكاشف مصفوفة ثنائي ضوئي. لتحليل SDE باستخدام HPLC، تم استخدام المادة الأوليةOتم شراء معيار -glucosylcimifugin من معهد الترويج الكوري لصناعة الطب التقليدي (جيونجسان، كوريا)، وثاني أكسيد الكربون-جلوكوزيل هامودول و 4'-O-β-د-جلوكوسيل-5-Oتم عزل -methylvisamminol داخل مختبرنا وتم التعرف عليه من خلال التحليلات الطيفية، في المقام الأول بواسطة NMR وMS.

أُذيبت عينات SDE (0.1 ملغ) في 70% إيثانول (10 مل). أُجري الفصل الكروماتوغرافي باستخدام عمود XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 مم، 5μم، شركة ووترز، ميلفورد، ماساتشوستس، الولايات المتحدة الأمريكية). يتكون الطور المتحرك من أسيتونتريل (أ) وحمض أسيتيك بتركيز 0.1% في الماء (ب) بمعدل تدفق 1.0 مل/دقيقة. استُخدم برنامج تدرج متعدد الخطوات على النحو التالي: 5% أ (0 دقيقة)، 5-20% أ (0-10 دقائق)، 20% أ (10-23 دقيقة)، و20-65% أ (23-40 دقيقة). تم مسح طول موجة الكشف عند 210-400 نانومتر وتسجيله عند 254 نانومتر. كان حجم الحقن 10.0μل. تم تحضير محاليل قياسية لتحديد ثلاثة كرومونات عند تركيز نهائي قدره 7.781 مجم/مل (التركيز الأولي).O-جلوكوزيل سيميفوجين)، 31.125 ملغ/مل (4'-O-β-د-جلوكوسيل-5-O-ميثيل فيسامينول)، و31.125 ملغ/مل (ثاني أكسيد الكربون-جلوكوزيل هامودول) في الميثانول ويتم حفظه عند 4 درجة مئوية.

2.3. تقييم النشاط المضاد للالتهاباتفي المختبر

٢.٣.١. زراعة الخلايا ومعالجة العينات

تم الحصول على 264.7 خلية خام من مجموعة زراعة النمط الأمريكي (ATCC، ماناساس، فرجينيا، الولايات المتحدة الأمريكية) ونُمِّيت في وسط DMEM يحتوي على 1% مضادات حيوية و5.5% مصل بقري. حُضِّنت الخلايا في جو مُرطَّب بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. لتحفيز الخلايا، استُبدِل الوسط بوسط DMEM جديد، وبولي سكاريد دهني (LPS، شركة سيجما-ألدريتش الكيميائية، سانت لويس، ميزوري، الولايات المتحدة الأمريكية) عند درجة حرارة 1.μتم إضافة جرام/مل في وجود أو غياب SDE (200 أو 400μجم/مل) لمدة 24 ساعة إضافية.

2.3.2. تحديد أكسيد النيتريك (NO)، والبروستاجلاندين E2 (PGE2)، وعامل نخر الورمα(TNF-α)، وإنتاج الإنترلوكين-6 (IL-6)

عولجت الخلايا باستخدام SDE وحُفِّزت باستخدام LPS لمدة 24 ساعة. حُلِّل إنتاج أكسيد النيتريك عن طريق قياس النتريت باستخدام كاشف Griess وفقًا لدراسة سابقة [12]. إفراز السيتوكينات الالتهابية PGE2 وTNF-αتم تحديد مستويات IL-6 باستخدام مجموعة ELISA (أنظمة البحث والتطوير) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. تم تحديد تأثيرات SDE على إنتاج أكسيد النيتريك والسيتوكين عند طول موجة 540 أو 450 نانومتر باستخدام Wallac EnVision.™قارئ اللوحات الدقيقة (PerkinElmer).

2.4. تقييم فعالية مضادات هشاشة العظامفي الجسم الحي

2.4.1. الحيوانات

تم شراء ذكور فئران سبراج داولي (عمرها 7 أسابيع) من شركة سامتاكو (أوسان، كوريا) وتم وضعها في ظروف خاضعة للرقابة مع دورة ضوء/ظلام مدتها 12 ساعة عند°م ونسبة الرطوبة %. تم تزويد الفئران بنظام غذائي مختبري وماءحسب الرغبةتم إجراء جميع الإجراءات التجريبية وفقًا لإرشادات المعاهد الوطنية للصحة (NIH) وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة رعاية الحيوان واستخدامه في جامعة دايجون (دايجون، جمهورية كوريا).

2.4.2. تحريض هشاشة العظام باستخدام MIA في الفئران

تم توزيع الحيوانات عشوائيًا وتعيينها إلى مجموعات العلاج قبل بدء الدراسة (لكل مجموعة). محلول MIA (3 ملغ/50μتم حقن لتر من محلول ملحي بتركيز 0.9% مباشرةً في التجويف المفصلي للركبة اليمنى تحت تأثير التخدير المُستحث بمزيج من الكيتامين والزيلازين. قُسِّمت الفئران عشوائيًا إلى أربع مجموعات: (1) المجموعة الملحية التي لم تُحقن بـ MIA، (2) المجموعة التي حُقنت بـ MIA، (3) المجموعة التي عولجت بـ SDE (200 ملغ/كغ) مع حقن MIA، و(4) المجموعة التي عولجت بـ (IM-) (2 ملغ/كغ) مع حقن MIA. أُعطيت الفئران عن طريق الفم بـ SDE و IM قبل أسبوع واحد من حقن MIA لمدة 4 أسابيع. استندت جرعة SDE و IM المستخدمة في هذه الدراسة إلى تلك المستخدمة في الدراسات السابقة [10،13،14].

٢.٤.٣. قياسات توزيع تحمل وزن الكفوف الخلفية

بعد تحريض هشاشة العظام، اختل التوازن الأصلي في قدرة تحمل الوزن للأقدام الخلفية. استُخدم جهاز اختبار العجز (لينتون للأجهزة، نورفولك، المملكة المتحدة) لتقييم التغيرات في تحمل الوزن. وُضعت الفئران بعناية في حجرة القياس. حُسب متوسط قوة تحمل الوزن التي يمارسها الطرف الخلفي على مدار 3 ثوانٍ. حُسبت نسبة توزيع الوزن بالمعادلة التالية: [وزن الطرف الخلفي الأيمن / (وزن الطرف الخلفي الأيمن + وزن الطرف الخلفي الأيسر)] × 100 [15].

2.4.4. قياس مستويات السيتوكينات في المصل

تم طرد عينات الدم مركزيًا بسرعة 1500 غرام لمدة 10 دقائق عند درجة حرارة 4 درجات مئوية؛ ثم جُمعت المصل وخُزنت عند درجة حرارة -70 درجة مئوية حتى الاستخدام. مستويات IL-1β، IL-6، TNF-α، وتم قياس مستويات PGE2 في المصل باستخدام مجموعات ELISA من R&D Systems (مينيابوليس، مينيسوتا، الولايات المتحدة الأمريكية) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة.

2.4.5. تحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي الكمي في الوقت الفعلي

تم استخلاص الحمض النووي الريبوزي الكلي من أنسجة مفصل الركبة باستخدام كاشف TRI® (Sigma-Aldrich، سانت لويس، ميزوري، الولايات المتحدة الأمريكية)، ثم نُسخ عكسيًا إلى cDNA، وجرى تضخيمه بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) باستخدام مجموعة TM One Step RT PCR مع صبغة SYBR الخضراء (Applied Biosystems، غراند آيلاند، نيويورك، الولايات المتحدة الأمريكية). أُجري تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الفعلي باستخدام نظام Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems، غراند آيلاند، نيويورك، الولايات المتحدة الأمريكية). يظهر الجدول تسلسلات البادئ وتسلسل المسبار.1تم تضخيم أجزاء من عينات الحمض النووي التكميلي (cDNA) وكمية مساوية من الحمض النووي التكميلي لـ GAPDH باستخدام خليط TaqMan® Universal PCR الرئيسي المحتوي على بوليميراز الحمض النووي (DNA) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة (Applied Biosystems، فوستر، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية). كانت ظروف تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) دقيقتين عند 50 درجة مئوية، و10 دقائق عند 94 درجة مئوية، و15 ثانية عند 95 درجة مئوية، ودقيقة واحدة عند 60 درجة مئوية لمدة 40 دورة. تم تحديد تركيز الجين المستهدف باستخدام طريقة Ct المقارنة (رقم دورة العتبة عند نقطة التقاطع بين مخطط التضخيم والعتبة)، وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة.

سعر فوب:0.5 - 9,999 دولار أمريكي / قطعة

الحد الأدنى لكمية الطلب:100 قطعة/قطع

القدرة على التوريد:10000 قطعة/قطع شهريًا

أرسل لنا بريدًا إلكترونيًا

تفاصيل المنتج

علامات المنتج

الفصال العظمي (OA) هو اضطراب الجهاز العضلي الهيكلي الأكثر شيوعًا وأمراض المفاصل التنكسية الأكثر شيوعًا لدى كبار السن [1]. هشاشة العظام هي حالة ناجمة جزئيًا عن الإصابة وفقدان بنية الغضروف ووظيفته واختلال تنظيم المسارات المؤيدة للالتهابات والمضادة للالتهابات [2،3]. يؤثر بشكل أساسي على الغضروف المفصلي والعظم تحت الغضروفي للمفاصل الزليلية ويؤدي إلى فشل المفصل، مما يؤدي إلى الألم عند تحمل الوزن بما في ذلك المشي والوقوف [4].

لا يوجد علاج لهشاشة العظام، حيث أنه من الصعب جدًا استعادة الغضروف بعد تدميره [5أهداف العلاج هي تخفيف الألم، والحفاظ على حركة المفاصل أو تحسينها، وزيادة قوتها، وتقليل الآثار المُعيقة للمرض. تهدف العلاجات الدوائية لهشاشة العظام إلى تخفيف الألم لتحسين وظيفة المفاصل وجودة حياة المريض. على الرغم من أن تلف الغضروف هو العامل الرئيسي في هشاشة العظام، إلا أن تدهور الكولاجين هو العامل الأساسي الذي يُحدد التطور غير القابل للعكس لهشاشة العظام المرتبط بالالتهاب.6،7من المتوقع أن تعمل العلاجات ذات النشاط المضاد للالتهابات والحماية للغضاريف على تخفيف الألم والحفاظ على سلامة المصفوفة لدى مرضى هشاشة العظام.

لذلك، من المرجح أن يكون تقليل الالتهاب مفيدًا في علاج هشاشة العظام. تشير الدراسات الحديثة إلى دور وقائي للموارد العشبية في تطور هشاشة العظام، من حيث تخفيف التهاب الخلايا الغضروفية وتدمير الغضاريف، من خلال قدرتها على التفاعل مع الأنسجة المرتبطة بالمفاصل، مما يؤدي إلى تخفيف آلام المفاصل.8].

جذرSaposhnikovia divaricataتم استخدام نبات شيشكين (Umbelliferae) على نطاق واسع في الطب التقليدي لعلاج الصداع والألم والالتهاب والتهاب المفاصل في كوريا والصين [9،10]. التأثيرات الدوائية المتنوعة لـSaposhnikovia divaricata(SD) تشمل أيضًا خصائص مضادة للالتهابات ومسكنة للألم وخافضة للحرارة ومضادة لالتهاب المفاصل [9،11]. أظهرت دراسة حديثة أن مستخلص كروم SD يمتلك تأثيرات محتملة مضادة لالتهاب المفاصل الروماتويدي في نموذج فأر لالتهاب المفاصل الناجم عن الكولاجين [10] ومع ذلك، فقد أجريت دراسات قليلة لدعم النشاط المضاد للالتهابات ومضاد التهاب المفاصلSaposhnikovia divaricataمستخلص (SDE).

لذلك، بحثت هذه الدراسة في الأنشطة المضادة للالتهابات والتهاب المفاصل العظمي لمستخلص إيثانولي بنسبة 70% من نبات شوك الجمل. أولًا، تم تقييم التأثير المضاد للالتهابات لمستخلص شوك الجمل.في المختبرفي خلايا RAW 264.7 المُستحثة بـ LPS. بعد ذلك، تم قياس تأثير SDE المضاد لهشاشة العظام من خلال تقييم توزيع الوزن، وتدهور الغضروف المفصلي، والاستجابات الالتهابية في نموذج جرذان لـ OA المُستحث بـ MIA-يودو أسيتات أحادي الصوديوم.